蛋白提取

組織樣本總蛋白提?。ㄐ∈蟾谓M織）

1、頸椎脫臼處死小鼠，75%乙醇擦拭皮膚，剪開(kāi)腹腔，剪切肝臟組織。

2、平皿中放入6ml預(yù)冷0.9%NaCL。

3、稱(chēng)取0.6g左右肝組織，在平皿中剪碎組織，并轉(zhuǎn)移到勻漿器。

4、預(yù)冷裂解液中添加PMSF（20ug/2ml）。

5、取2ml預(yù)冷裂解緩沖液，迅速加入勻漿器，冰浴條件下充分研磨。

6、組織研磨液轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管。

7、4℃，15000rpm，離心10min。

8、取上清組織蛋白粗提取液至新的1.5ml離心管。

9、進(jìn)行蛋白定量，-80℃保存。

蛋白提取

組織樣本總蛋白提?。ㄐ∈蟾谓M織）

1、頸椎脫臼處死小鼠，75%乙醇擦拭皮膚，剪開(kāi)腹腔，剪切肝臟組織。

2、平皿中放入6ml預(yù)冷0.9%NaCL。

3、稱(chēng)取0.6g左右肝組織，在平皿中剪碎組織，并轉(zhuǎn)移到勻漿器。

4、預(yù)冷裂解液中添加PMSF（20ug/2ml）。

5、取2ml預(yù)冷裂解緩沖液，迅速加入勻漿器，冰浴條件下充分研磨。

6、組織研磨液轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管。

7、4℃，15000rpm，離心10min。

8、取上清組織蛋白粗提取液至新的1.5ml離心管。

9、進(jìn)行蛋白定量，-80℃保存。